(重)结核分枝杆菌H37Rv以柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及活性

Release time:2021-04-12  Hits:

• Affiliation of Author(s):化学与生命科学学院
• Teaching and Research Group:化学与生命科学学院
• Journal:吉林大学学报.理学版
• Funded by:省、市、自治区科技项目
• Key Words:结核分枝杆菌； 异柠檬酸裂解酶； 基因表达
• Abstract:以结核分枝杆菌H37Rv基因为模板, PCR反应扩增该菌株的异柠檬酸裂解酶基因（ICL）, 将其克隆入原核表达载体pET28b中, 并将pET28bICL转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达. 结果表明, ICL蛋白的最佳诱导表达条件为: 温度20 ℃, IPTG终浓度为025 mmol/L, 诱导表达4 h, 在此条件下 ICL实现了高效表达, 以镍离子螯合型琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化ICL蛋白, 纯化程度较高. 酶学性质鉴定表明, 实验获得了具有生物学活性的重组蛋白, 重组ICL的比活力为24 μmol/(mg·min).
• First Author:carter
• Indexed by:Journal paper
• Volume:49
• Issue:4
• Page Number:3
• Number of Words:1
• ISSN No.:0412-1961
• Translation or Not:no
• CN No.:21-1139/TG
• Date of Publication:2011-07-26